大花蕙兰新品种组织培养快繁技术
摘要：以5个韩国引进的大花蕙兰慢性开花新品种为材料，进行大花蕙兰新品种组培繁育及产业化技术研究。结果表明：大花蕙兰适宜在MS+BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的培养基上增殖，每瓶生根有效苗数相对较多，达到14.89；茎芽平均高度相对较高，平均高度达到7.10cm，而且长势良好。适宜生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+白糖20g/L+花宝5号0.5g/L，每株平均根数达到4.28，平均根长达到3.55cm。苗高达到5cm以上时植株易于成活，种植不宜过深，浇水不宜太频繁。
1、材料与方法
1.1试验材料
供试材料为从韩国引进的5个大花蕙兰新品种无菌继代材料。5个大花蕙兰新品种分别为：‘LunarblazeNo.1’、‘Khanflamehotcocoa’、‘Valleyzenithconcord’、‘Corakigold’、‘Onetreehillsolticegold’。
1.2试验方法
1.2.1原球茎的增殖
以MS或1/2MS为基本培养基，附加30g/L白糖(“田趣”牌,下同)和6g/L卡拉胶(闽南琼胶有限公司出品，下同)，pH5.8～6.0，添加不同浓度的IBA和NAA。每处理接种10瓶(mL广口瓶)，每瓶8个带芽或不带芽匍匐茎。每处理3次重复。培养60d后统计增殖系数。培养室中培养温度(25±2)℃，光照12h/d，光照度～lx。
1.2.2生根培养
生根培养以MS或1/2MS为基本培养基，附加8g/L卡拉胶和质量分数0.5%的活性炭，添加不同浓度的IBA和NAA与白糖、花宝5号，pH5.8～6.0。每处理接种10瓶，每瓶6个芽。每处理3次重复。
在培养室中培养，培养温度(25±2)℃，光照12h/d，光照度～0lx。
1.2.3炼苗
培养室培养45d后的生根苗，移入玻璃温室炼苗约15d。光照度0～lx。生根接种60d后对每株统计根长、根数、根长和生根率。
1.2.4移栽
将兰石和草炭作为栽培基质，装入黑色塑料营养袋，移入简易温室中，以0.1‰～1‰高锰酸钾消毒。将炼苗得到的大花蕙兰瓶苗，用自来水将植株根部的培养基冲洗干净，50%多菌灵可湿性粉剂倍和80%代森锰锌可湿性粉剂倍浸泡10min消毒后，植入营养袋中，覆盖薄膜保湿。第7天前每天向叶片喷水1次，第7～14天每3d喷1次，以后每7d噴1次。
采用SPSS11.5软件对试验数据进行单因素方差分析，置信度0.05。
2、结果与分析
2.1增殖培养基的选择
基本培养基的选择：分别采用MS、1/2MS为基本培养基，附加同样浓度的IBA0.5mg/L和NAA0.2mg/L，60d后统计生长状况。经SPSS单因素方差分析，以MS、1/2MS为基本培养基培养出的茎芽在增殖倍数上没有显著差异，但在生根有效苗数和茎芽高度上有显著差异。在MS培养基上的每瓶生根有效苗数相对较多，达到14.89个；茎芽平均高度相对较高，平均高度达到7.10cm，而且长势比较好，叶片相对较绿，所以选择MS+BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L为大花蕙兰增殖培养基。
2.2生根培养的选择
将增殖培养获得的大花蕙兰生根有效苗转接到MS或1/2MS为基本培养基，附加不同浓度IBA、NAA、白糖以及花宝5号。经45d培养室培养，随后15d炼苗，统计其生根状况。
经过SPSS单因素方差Duncan分析,发现各培养基平均根条数具有显著差异、平均根长具有极显著差异。同时考虑平均根数和平均根长，第1，6，12，15培养条件平均根数和平均根长均与其他处理差异显著，其中第12培养基根长最佳，所以选择第12培养基为最佳生根培养基，即1/2MS+IBA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+白糖20g/L+添加物A0.5g/L，每株平均根数达到4.28条，平均根长达到3.55cm。
2.3组培苗移栽
共移栽组培菌株，移栽培养5d后，刚开始幼苗部分出现死亡现象，大多发生于较小的植株(A类),平均成活率仅为46%；较大的植株(B类)则生长良好，平均成活率为81%，二者成活率具有显著差异(表3)。说明组培苗个体大且健壮，移栽后的成活状况越好。一般要求移栽的植株苗高要达到5cm以上、展开的叶片3～5片以及2条以上长度大于3cm的根。
3、总结
大花蕙兰在在增殖培养过程中，不添加柠檬酸、2,4-D、KT、香蕉泥、水解酪蛋白，与别的作者报道不同，组培生产过程中可以节约时间和成本。试验中发现，如果生根培养基添加生长素过多，如IBA和NAA同时为1mg/L，根不是往下长，而是往上长，给苗木移栽带来不利影响。
移栽试验发现苗高达到5cm以上、展开的叶片3～5片以及2条以上长度大于3cm的根时植株易于成活。大花蕙兰组培苗移栽过程，不宜种植过深,根茎部位应该在基质平面。若种植太深，可导致烂苗的发生。移栽时天气不宜过热，气温超过35℃时，应该考虑透气降温，否则易发生烂苗现象。夏天组培苗移栽时，不宜长期用薄膜覆盖，适当改用遮阳网，否则易发生病害。苗木移栽后浇水次数不宜过于频繁，以3～5d浇水1次为宜，否则易发生病害。
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